天狼猩红染色

   天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。偏振光镜检测，胶原纤维有正的单轴双折光性的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。天狼星红染色液主要由 Weigert 铁苏木素染色液、天狼星红染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，肌纤维被染成黄色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。

实验原理

利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象，使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

实验步骤

1. 组织固定于4%的多聚甲醛固定液，常规脱水包埋。

2. 切片厚度 6μm，常规脱蜡至水。

3. weigert 铁苏木素染色液染色 10-20min。

4. 酸性分化液分化数秒（可省略）。

5. 自来水洗 5-10min，蒸馏水洗一次。

6. 天狼星红染色液滴染 1h。

7. 流水稍冲洗，去除切片表面染液。

8. 常规脱水透明，中性树胶封固。

结果判读

胶原纤维呈亮红色，其他结构呈黄色。

天狼猩红-小鼠肝纤维化-100X

注意事项

1. 为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm为宜。

2. 用Weigert铁苏木素染液染细胞核，可不受天狼星红染液的影响。

3. 本法染色稳定，不易褪色。

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