病理学技术服务

扫描电镜

实验原理

电子探针在样品表面做光栅状扫描并且激发出多种电子信号,如二次电子、背散射电子、特征X线等,这些电子信号被转换、放大成电压信号,最终在荧光屏上呈现二次电子图像,反映了样本表面的形貌特征。


实验步骤

1.脱水:样本经固定后用梯度酒精或丙酮脱水,然后进入中间液(醋酸异戊酯)

2.干燥:样本放入临界点干燥仪内干燥

3.导电处理:样本紧贴导电碳膜双面胶上放入离子溅射仪,对样品上进行喷金

4.电镜拍照


结果判读

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注意事项

1.取材要快速,需在1-3min内完成取样;

2.取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。尤其是注意保护扫描面。

3.植物样本放入固定液后需抽气沉底


送样要求

1、动植物组织样本

 组织块取材不超过0.5mm2,加电镜固定液,室温固定2h,4℃冰袋运输,切勿冻结。

2、细胞样本

 贴壁细胞:制成爬片,加电镜固定液,室温固定30min后,在孔板内4度冰袋运输,切勿冻结。

 悬浮细胞:离心收集细胞大概米粒大小,加电镜固定液,吹散,室温固定30min后,在孔板内4度冰袋运输,切勿冻结。

3、细菌样本:细菌PBS多次洗涤后,加电镜固定液重悬固定,4度冰袋运输,切勿冻结。

扫描电镜样本准备方法及要求.docx

  

                                                             送检要求

           样品类型

                                         样本需求

        保存条件

       运输条件

          动物组织

单个样品大于0.1g

-80℃

干冰

种子样本

单个样品大于0.2g

-80℃

干冰

细胞样本

          qPCR/WB:单个样本不少于106个细胞

-80℃

干冰

血液样本

骨髓1-3ml;用抗凝管保存的外周血5-10ml

-80℃

干冰

石蜡包埋样本

包埋石蜡块大于0.1cm

-20℃

冰袋

抗体

提供足量,并附带抗体说明书

-20℃

冰袋

引物

如需预实验,引物两对,附带引物合成单

-20℃

冰袋

备注:每个样本仅保留唯一且清析可识的标记;邮寄前请与公司专业人员确认方法最佳;


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