实验简介
腺病毒是一种无包膜的线状双链DNA病毒。除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞,腺病毒系统可以在任何哺乳动物细胞中高效瞬时表达。感染宿主细胞时,病毒基因组及其携带的外源基因独立于宿主基因组外游离表达,无插入突变性,安全性高。腺病毒载体的外源基因装载量较大,表达速度快,可获得高滴度的病毒。
实验步骤
1. 构建目的基因腺病毒载体
2. 采用 PacI 消化纯化的质粒。
3. 消化好的腺病毒表达载体转染 293T细胞,收获细胞制备病毒粗提液。
4. 将病毒粗提液感染 293T细胞以扩增病毒。
5. 分装,-80℃保存。
结果展示
送检要求
样品类型 | 样本需求 | 保存条件 | 运输条件 |
动物组织 | 单个样品大于0.1g | -80℃ | 干冰 |
种子样本 | 单个样品大于0.2g | -80℃ | 干冰 |
细胞样本 | qPCR/WB:单个样本不少于106个细胞 | -80℃ | 干冰 |
血液样本 | 骨髓1-3ml;用抗凝管保存的外周血5-10ml | -80℃ | 干冰 |
石蜡包埋样本 | 包埋石蜡块大于0.1cm | -20℃ | 冰袋 |
抗体 | 提供足量,并附带抗体说明书 | -20℃ | 冰袋 |
引物 | 如需预实验,引物两对,附带引物合成单 | -20℃ | 冰袋 |
备注:每个样本仅保留唯一且清析可识的标记;邮寄前请与公司专业人员确认方法最佳; |