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裸鼠脑胶质瘤原位移植模型

1 背景

实验目的胶质瘤是脑内最常见、浸润性最强的一种原发性脑肿瘤,因其恶性程度较高,患者存活期很短,临床治疗效果差,病死率很高在很大程度上威胁着人类的健康。而且,近年来其发病率有逐年上升的趋势。提高其早期诊断准确率及寻找新的治疗方案是目前研究的热点问题。针对胶质瘤研究首要的一点是建立准确可靠的胶质瘤模型。脑原位移植瘤模型形成的胶质瘤生物学性质与人类更接近,是一种理想的研究脑胶质瘤的生物学行为和治疗方法的实验工具,但不如皮下移植瘤易于观察。

 

2 动物信息

品系:Balb/C-nu裸鼠

性别:雌雄不限

周龄:6-8周

体重:18-20g

 

3 操作流程

1)动物适应性饲养7天;

2)手术前将房间进行紫外线照射消毒,手术物品提前高压灭菌后放入超净工作台,将手术需要的物品及调试好的立体定位仪,一起放入超净工作台,手术前打开超净工作台的紫外灯照射15min进行消毒。

3)手术前一天,将裸鼠禁食,手术当天,裸鼠称重麻醉后,放在保温垫上,头部固定于立体定位仪上,用碘伏对头部进行消毒后,按照矢状中线位置纵向切开皮肤,切口长度约1cm,根据立体定位仪解剖图谱确定对应于右侧尾状核的位置: 前囟点前1.0mm,中线右1.0 mm,深度为硬膜下3.0 mm,以颅骨钻钻孔,勿损伤硬脑膜。使用10μL 微量注射器吸入5μL 含1×105LN229-Luc 细胞悬液,注射细胞悬液3 min,留针2 min,钻孔用人工石蜡封闭,用5号线缝合,切口涂红霉素软膏以防术后感染。

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4)术后护理:裸鼠苏醒后放入新更换的IVC 鼠盒,并给予适当保温,每天观察小鼠状态,碘伏擦拭伤口,连续3d,整个过程动作轻柔,保证充足的饮水和饲料。


4 实验结果鉴定

1)小动物活体成像观察荷瘤小鼠腹腔注射荧光素底物( 150 mg/kg ) ,异氟烷麻醉5min 后,放入小动物活体成像系统进行检测。裸鼠于脑内接种后Day14、Day21、Day28、Day35、Day42 进行小动物活体成像检查,监测脑内原位接种肿瘤生长情况。

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2)病理形态学观察:裸鼠于术后第42 天活体成像监测后进行安乐死,解剖取出整个脑组织于福尔马林中固定,HE 染色后,进行组织病理学检查,观察肿瘤组织细胞形态及生长情况。



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