1 背景
6-OHDA是一种去甲肾上腺素同系物，对儿茶酚胺神经元及其末梢具有选择性损毁作用，使黑质的多巴胺(dopamine, DA)合成及向纹状体的输送通路受到破坏，导致儿茶酚胺类递质和乙酰胆碱类递质失衡，从而产生偏侧旋转等一系列类似于人类帕金森病(parkinson disease, PD)症状和病理的特征性变化。
2 动物信息及药物配制
2.1 动物信息
品系：Wistar大鼠
性别：雄性
周龄：6-8周
体重：180-220g
2.2 药物配制
6-OHDA溶于0.2％的抗坏血酸生理盐水中，浓度4 ug/uL
3 操作流程
1）动物适应性饲养7天；
2）模型组大鼠麻醉后，剪去头部毛发，将大鼠固定于三维脑立体定向仪上，采取颅平位。手术区域皮肤消毒，皮正中切口，暴露前囟。将6-羟多巴胺(6-OHDA)注射进入脑内黑质－纹状体的以下部位：
第一点坐标是：前囟前1.0，矢状缝右侧3.0，硬膜下4.5；
第二点坐标是：前囟后1.0，矢状缝右侧4.5，硬膜下6.0 。
按上述坐标用微型磨钻开颅后，用微量注射器将4 ug/uL的6-OHDA(溶于0.2%抗坏血酸生理盐水中)4 ul注入上述两点，注射速度1uL/min，注毕留针10 min，退针速度为1 mm/min，以防药液溢出。术毕大鼠腹腔注射头孢唑啉(50mg/kg)抗炎。对照组动物仅向两点注射含0.2 抗坏血酸的生理盐水4 uL，其余操作同前。
4 实验结果鉴定
1）阿扑吗啡诱导旋转实验：造模鼠于术后7、14、21、28d分别给予阿朴吗啡进行旋转行为检测。皮下注射阿朴吗啡(0.05 mg/kg)诱发其旋转行为。动物旋转时以健侧前肢或后肢为支点、身体环曲、首尾相接的原地旋转，伴觅食样动作。 旋转360度为一转(r)，60 min内记录大鼠向损毁对侧的旋转次数。动物的旋转行为达到或超过了7次/min，持续时间达30min，作为PD症状的定量指标。一般连续4周用阿朴吗啡诱发旋转次数保持稳定，即表示损毁作用已达稳定，可供试验之用。
2）行为学检测结束后，动物麻醉后开胸，用生理盐水100～200ml左心室冲洗，然后以4℃的4％多聚甲醛(pH=7.4，0.1mol/L PBS)300ml做灌注前固定。迅速断头取脑，将脑浸入4％多聚甲醛4℃过夜，再移入含30％蔗糖PBS中4℃过夜(脱水)，直至脑组织沉入容器底部，于纹状体(前囟后0.2mm)及黑质区(前囟后5.5mm)行连续冰冻横切片，片厚30μm，每间隔5张取一片作为切片。进行神经元尼氏体染色及免疫组织化染色，作TH免疫细胞化学染色，观察大鼠黑质纹状体多巴胺细胞的损毁情况。
