1 背景
裸鼠先天性T淋巴细胞缺陷,诱导产生的体液免疫应答较弱,可将人体肿在裸鼠体内移植成功。利用裸鼠建立的人肝癌裸鼠原位移植瘤,呈圆形、椭圆形或呈分叶状,少数移植瘤有完整的泡膜形成,大多数移植瘤与周围组织粘连,无完整的泡膜形成,瘤体周围血管丰富。
2 动物信息
品系:Balb/C-nude小鼠
性别:不限
周龄:6-8周
体重:18-20g
3 操作流程
1)动物适应性饲养7天;
2)裸鼠肝原位移植瘤模型制备:裸鼠以麻醉机麻醉后固定,腹部正中横切口暴露肝脏, 用10 ml 注射器针头做1 个深1~2 mm 的隧道,将肿瘤组织或细胞植入隧道内,明胶海绵压迫止血后全层关腹。
3)裸鼠肝癌肝脏微小转移灶模型制备: 收集对数生长期的人肝癌细胞HepG2 制成单细胞悬液,分别注射于3 只裸鼠脾脏上极,每只裸鼠注射0.1 ml,含细胞数2×106 个,5 min 后待细胞进入门静脉,行脾脏切除,缝合关腹,继续常规饲养。
4 实验结果鉴定
1)大体观察:
原位移植模型:
细小转移灶模型:
2)病理组织学检查:4 周后处死裸鼠, 取材,10%中性甲醛固定组织,酒精梯度脱水,石蜡包埋,4μm 连续切片,HE 染色,显微镜下观察形态。
原位移植模型:
细小转移灶模型: