1 背景
胰腺癌(pancreatic cancer)是一种恶性程度很高的肿瘤,其突出的特征是发现较难、早期转移,预后较差。裸鼠先天性T淋巴细胞缺陷,诱导产生的体液免疫应答较弱,可将人体肿在裸鼠体内移植成功。利用裸鼠建立的人胰腺癌裸鼠原位移植瘤,呈圆形、椭圆形或呈分叶状,少数移植瘤有完整的泡膜形成,大多数移植瘤与周围组织粘连,无完整的泡膜形成,瘤体周围血管丰富。
2 动物信息
品系:Balb/C-nude小鼠
性别:不限
周龄:6-8周
体重:18-20g
3 操作流程
1)动物适应性饲养7天;
2)皮下移植瘤模型:75% 酒精棉球消毒裸小鼠皮肤, 将( 2~ 3) ×106 ( 0.2 ml)的单细胞悬液接种于裸鼠右肩背部皮下,建立皮下移植瘤模型。密切观察皮下肿瘤生长情况,每周用游标卡尺测量肿瘤大小,按公式V= 1/2长径×短径2,计算肿瘤体积,并绘制皮下移植瘤生长曲线。
3)原位移植瘤模型:3周左右待皮下移植瘤长至1 cm 大小时,颈椎脱位法处死皮下荷瘤鼠,消毒皮肤,取下肿瘤,浸入含100 U/mL青霉素和100 ug/mL链霉素的高糖DMEM无血清培养基,去除中央坏死组织,选取周围健康肿瘤组织,剪成大小约1 mm3瘤块供原位移植用。麻醉机麻醉裸鼠,75%酒精消毒皮肤,左上腹直肠旁线处行1 cm 的纵行切口,仔细分开胃与脾之间的薄膜,暴露胰腺,剪开胰腺被膜,将1 mm3瘤块植入胰体尾处,以8-0 可吸收外科缝线缝合胰腺被膜。将胰腺轻轻送回腹腔, 6-0可吸收外科缝线单层缝合腹壁肌层及皮肤。
4 实验结果鉴定
8周后,摘取移植瘤,福尔马林固定,石蜡包埋,进行HE染色。