细胞技术服务

细胞凋亡检测实验

技术原理

细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡是指人体自身为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主、有序的死亡,它与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca6+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素FITC标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。


 服务流程  

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结果展示


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                                          正常组                                                                      药物处理组



                    


                     送检要求

    样品类型

                                         样本需求

        保存条件

       运输条件

          动物组织

单个样品大于0.1g

-80℃

干冰

种子样本

单个样品大于0.2g

-80℃

干冰

细胞样本

         qPCR/WB:单个样本不少于106个细胞

-80℃

干冰

血液样本

骨髓1-3ml;用抗凝管保存的外周血5-10ml

-80℃

干冰

石蜡包埋样本

包埋石蜡块大于0.1cm

-20℃

冰袋

抗体

提供足量,并附带抗体说明书

-20℃

冰袋

引物

如需预实验,引物两对,附带引物合成单

-20℃

冰袋

备注:每个样本仅保留唯一且清析可识的标记;邮寄前请与公司专业人员确认方法最佳;


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