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II型胶原蛋白酶诱导大鼠膝骨关节炎模型

背景

膝骨性关节炎( knee osteoarthritis,KOA) 是一种膝关节软骨退行性改变为主的慢性骨关节病,以关节软骨破坏、软骨下骨硬化和增生为主要病理特征,表现为关节疼痛、功能障碍等。在全球60 岁以上的老年人中,约9. 6%的男性和18%的女性患有KOA。KOA发病率逐年增高,老年患者甚至生活无法自理,成为社会和家庭的负担。目前,西医应用激素非甾体抗炎药等药物或人工关节置换治疗KOA。药物治疗虽能缓解症状,但存在不良反应较大,远期疗效不肯定,无法长期使用的缺点。而人工关节置换预后不良且费用高昂,给家庭带来极大的经济负担。因此,KOA 的临床及实验研究尤为重要,而KOA 模型研究为其作用机制、防治手段研究的前提,可为KOA 的研究提供基础。

 

2 动物信息及药物配制

品系:Wistar大鼠

性别:雄性

周龄:6-8周

体重:180-220g

 

3 操作流程

1)动物适应性饲养7天;

2)大鼠麻醉后仰卧位固定,剃去右后肢膝关节周边1 cm 区域的毛发,碘消毒后再以体积分数75%的乙醇脱碘,右膝关节韧带内侧空白对照组注射0. 1mL 生理盐水,模型组第1、4 天注射0. 05mLⅡ型胶原蛋白酶溶液( 4mg /mL)。

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4 实验结果鉴定

1) 行为学测定:旷场实验测定运动距离、时间;

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2) 膝关节病理学观察: 造模后第28 天,各组大鼠处死后用骨科剪剪下右后膝关节,多聚甲醛固定,不同浓度梯度乙醇脱水,石蜡包埋、切片、进行HE 染色,光学显微镜观察组织病理变化,并进行病理评分,膝关节软骨采用mankin 评分标准对滑膜分级评分。


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