1 背景
哮喘是一种严重威胁人类健康的常见呼吸道疾病,是一种非特异的气道慢性变态反应性炎症,以嗜酸性粒细胞 (Eosinophils, EOS)聚集、活化及其高毒性阳离子蛋白的释放、肥大细胞反应为主,并伴随多种炎症细胞、炎症介质及细胞因子的参与的一种慢性炎症性疾病。哮喘是全球范围内严重威胁公众健康的慢性疾病之一,其常见症状是发作性的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状,少数患者还可能以胸痛为主要表现。这些症状经常在患者接触烟雾、香水、油漆、灰尘、宠物、花粉等刺激性气体或变应原之后发作,夜间和(或)清晨症状也容易发生或加剧。症状通常是发作性的,多数患者可自行缓解或经治疗缓解。因哮喘疾病发生、发展过程非常复杂,要经临床实践积累相关经验,并且人体临床实验受到种种限制。因此,在人体深入探讨该病的发病机制、预防及治疗有一定困难。所以,制备哮喘动物模型是进行有关哮喘发病机制或药物治疗研究成功的关键所在。
2 动物信息及药物配制
2.1 动物信息
品系:Balb/C小鼠
性别:雄性
周龄:6-8周
体重:18-22g
2.2致敏剂配制
以每只小鼠20ugOVA加氢氧化铝凝胶至300uL的剂量(或20ug OVA、75uL CFA加PBS至300uL)配制混合液,振荡器上振荡两分钟,形成混悬液。
3 操作流程
1)动物适应性饲养7天;
2)致敏:用注射器分别于小鼠腹部皮下、左右背部皮下各注射100uL新配置的混悬液(每只共300uL),注射时间为第1、8、15天。
3)激发:于第22天开始,以5%OVA溶液用超声雾化器雾化使小鼠吸入,每次30分钟,连续激发7天。
4 实验结果鉴定
1)造模成功的小鼠外观及行为学表现为:小鼠腹腔致敏后出现体重下降,经抗原激发出现烦躁不安、擦鼻、打喷嚏、呼吸困难或呼吸节律不整、腹肌抽搐、口唇紫绀伴腹式呼吸、毛发竖起、反应迟钝等症状。
2)肺组织HE染色