1 背景
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是胰岛素抵抗和胰岛素缺乏导致的以高血糖为主要特征表现的代谢紊乱综合征,易发生心、脑、肾等并发症。糖尿病状态下血浆游离脂肪酸异常增高,心肌耗能增加,葡萄糖代谢下降,脂肪酸代谢增加,心脏内过量的脂肪酸摄取和氧化导致心肌内脂肪代谢产物的积聚引起心脏脂质毒性,并在此基袖上出现氧化应激,导致细胞调亡、内皮功能紊乱、炎症反应增加,同时出现心肌的损伤,心肌的结构和功能均发生改变,最后导致糖尿病患者的死亡。
2 动物信息及药物配制
2.1 动物信息
品系:SD大鼠
性别:雄性
周龄:6-8周
体重:180-220g
2.2 药物配制
1)缓冲液配制:
柠檬酸(FW:210.14) 2.1g加入双蒸水100mL中配成A液
柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成B液
链脲佐菌素配制液:使用时将A、B液按1:1比例混合,PH计测定ph值,调节ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。
2)STZ溶液配制:
用干燥锡箔纸称取STZ粉末称取100mg,迅速溶解到10ml柠檬酸缓冲液中,其浓度为1%。
STZ容易失活,溶解过程及溶解后均放置于冰上,并在30min内注完。
3 操作流程
1)动物适应性饲养7天;
2)注射造模:禁食16h后,大鼠一次性腹腔注射1%STZ溶液60mg/kg(6ml/kg)。
3)验证:注射72h后,剪掉大鼠尾部尖端少许,用血糖仪测量大鼠血糖,血糖高于16.7mmol/L视为造模成功。造模不成功者,补注STZ(10mg-20mg/kg)。
4)造模后护理:降低饲养密度,每天换水以保证饮水充足,保证饲料充足,提高垫料更换频率。若有注射、采血、手术等侵入性操作,要注意操作前后的消毒工作。
4 实验结果鉴定
末次注射STZ后72h,测量大鼠尾尖血血糖,以空腹血糖≥11.1mmol/L,或随机血糖≥16.7mmol/L为标准判定造模成功。其余检测指标如下:
1)体重、摄食量
2)血糖、糖化血红蛋白(HbA1c),血清胰岛素水平,GTT/ITT。